Technegau Tyllu Mêr Esgyrn A Biopsi mewn Archesgobion Di-Dynol: Ffocws ar Gymhwysiad Nodwyddau Biopsi

Mae primatiaid nad ydynt yn ddynol (NHPs) yn anifeiliaid arbrofol craidd ar gyfer ymchwil haematoleg cyn-glinigol, datblygu cyffuriau bôn-gelloedd, archwilio mecanwaith imiwnedd ac astudiaethau meddygaeth drosiadol. Sbesimenau -ansawdd uchel, isel-halogiad a mêr esgyrn cyflawn yw cynsail a sylfaen data arbrofol dibynadwy. Tyllu mêr esgyrn a biopsi craidd yw'r technegau samplu mêr esgyrn in vivo mwyaf prif ffrwd ar gyfer primatiaid nad ydynt yn ddynol. Yn wahanol i gasgliad gwaed gwythiennol arferol, mae'r dechnoleg hon yn dibynnu ar nodwyddau biopsi gwag caled proffesiynol i dreiddio i asgwrn cortigol esgyrn hir ac esgyrn gwastad, a chael hylif mêr esgyrn cymwys a meinweoedd craidd mêr esgyrn cyfan o'r ceudod medwlari. Mae'r llawdriniaeth gyfan yn ddibynnol iawn ar fanylebau perfformiad, paru model a chymhwyso nodwyddau biopsi mêr esgyrn yn safonol. Wedi'i gyfuno â phrotocolau arbrofion anifeiliaid aeddfed a phrofiad llenyddiaeth, mae'r erthygl hon yn ymhelaethu'n systematig ar fanylebau gweithredu proses lawn tyllu mêr esgyrn a biopsi NHP, gan ganolbwyntio ar nodweddion dethol, manteision cymhwyso a hanfodion gweithredu safonol nodwyddau biopsi pwrpasol, i ddarparu canllawiau technegol safonol ar gyfer ymchwilwyr arbrofol.

Mae egwyddor dechnegol sylfaenol tyllu mêr esgyrn a biopsi mewn primatiaid nad ydynt yn ddynol yn gyson â'r system samplu mêr esgyrn cwn clasurol (Crow et al., 2009). Y rhesymeg graidd yw defnyddio nodwyddau biopsi gwag anhyblyg i dorri trwy'r rhwystr esgyrn cortigol caled, lleoli'r ceudod medullary yn gywir, a chael hylif mêr esgyrn a sbesimenau craidd solet trwy ddyhead pwysedd negyddol a mewnosod torri cylchdro. Yn ôl nodweddion anatomegol NHPs, mae'r safleoedd samplu cyffredin wedi'u rhannu'n ardaloedd blaenelimb ac ôl. Mae safleoedd samplu blaenoriaeth y goes ôl yn cynnwys crib iliac a fossa trochanteric femoral (Wolf & White, 2012), sy'n addas ar gyfer y rhan fwyaf o fodelau primatiaid canolig a mawr; y safle arall forelimb yw'r twbercwl mwy humeral, gyda safle anatomegol bas a gweithrediad cyfleus, sy'n addas ar gyfer samplu atodol ac arbrofion samplu dro ar ôl tro. Mae gan wahanol safleoedd samplu wahaniaethau mewn trwch esgyrn, diamedr ceudod medullary a gorchudd meinwe meddal, y mae angen eu paru â manylebau cyfatebol nodwyddau biopsi mêr esgyrn i sicrhau effeithlonrwydd samplu ac ansawdd sbesimen.

Fel llawdriniaeth asgwrn ymledol, bydd tyllu mêr esgyrn NHP a biopsi yn achosi ysgogiad meinwe bendant ac ymateb i boen. Er mwyn sicrhau lles anifeiliaid a gweithrediad arbrofol sefydlog, rhaid cyflawni pob gweithrediad samplu o dan anesthesia safonol. Gall ymchwilwyr ddewis anesthesia cyffredinol neu anesthesia lleol wedi'i dargedu yn ôl y cylch arbrofol, amlder samplu a chyflwr unigol anifeiliaid, er mwyn cyflawni digon o analgesia mewnlawdriniaethol ac ar ôl llawdriniaeth. Yn ogystal, rhaid i'r broses gyfan gadw'n gaeth at fanylebau arbrofol di-haint, gan gynnwys eillio cyn llawdriniaeth a pharatoi croen yr ardal samplu, diheintio aml-safonol â povidone-ïodin ac alcohol, gosod tywelion di-haint, a gwisgo menig di-haint ac offer llawfeddygol, er mwyn osgoi haint lleol, llid clwyfau a chymhlethdodau eraill ar ôl llawdriniaeth sy'n effeithio ar arbrofion ailadroddus dilynol yn effeithiol.

Dosbarthu, Dethol a Pherfformiad Manteision Nodwyddau Biopsi Mêr Esgyrn Arbennig

Nodwyddau biopsi mêr esgyrn yw'r offeryn manwl craidd ar gyfer samplu mêr esgyrn NHP, sy'n pennu cyfradd llwyddiant un{0}}tyllu amser, cywirdeb sbesimen a gradd halogiad gwaed ymylol. Ar hyn o bryd, mae modelau masnachol aeddfed lluosog o nodwyddau samplu mêr esgyrn arbennig ar gyfer anifeiliaid arbrofol, gan gynnwys Rosenthal, Klima, nodwydd sternal/iliac Illinois a nodwydd Jamshidi. Mae gan bob model ddyluniad gwahaniaethol o ran hyd nodwydd, diamedr mesurydd, strwythur craidd mewnol a gafael llaw, gan addasu i wahanol fathau o gorff anifeiliaid, nodweddion anatomegol esgyrn a dibenion samplu arbrofol.

Ymhlith pob math o nodwydd, y14G nodwydd biopsi mêr esgyrn Jamshidiyw'r safon aur ar gyfer biopsi craidd mêr esgyrn NHP, sef y fanyleb a argymhellir fwyaf ar gyfer gweithrediadau arbrofol. Mae'r math hwn o nodwydd biopsi yn mabwysiadu strwythur gwag anhyblyg wedi'i optimeiddio, gyda stylet solet canolog cyfatebol. Mae gan gorff y nodwydd galedwch a chaledwch cymedrol, a all dreiddio i asgwrn cortical primatiaid yn effeithiol heb blygu na llithro. Gall yr ymyl torri troellog ar flaen y nodwydd wreiddio a rhyng-gipio meinweoedd craidd mêr esgyrn cyflawn yn sefydlog, gan osgoi darnio sbesimen a difrod allwthio meinwe a achosir gan fathau amhroffesiynol o nodwyddau. O'i gymharu â -nodwyddau allsugno mesurydd tenau, mae gan nodwydd biopsi Jamshidi 14G ddiamedr ceudod mewnol mwy, a all gael digon o sbesimenau craidd cyfaint tra'n sicrhau diogelwch, gan ddiwallu anghenion canfod morffolegol, torri meinwe a dadansoddi mynegai arbrofol biopsi craidd. O'i gymharu â nodwyddau trwchus rhy fawr, gall leihau trawma esgyrn gormodol a gwaedu mewnlawdriniaethol yn effeithiol, gan gydbwyso ansawdd sbesimen a defnydd amlroddadwy anifeiliaid.

Mae'r holl nodwyddau biopsi mêr esgyrn arbennig wedi'u cynllunio gyda stylet canolog cyfatebol, sy'n nodwedd strwythurol allweddol sy'n wahanol i nodwyddau pigiad cyffredin. Gall y stylet rwystro ceudod gwag y corff nodwydd yn llwyr yn ystod twll, atal meinwe meddal y croen a malurion esgyrn rhag mynd i mewn i'r ceudod nodwydd i rwystro'r biblinell, a sicrhau cynnydd llyfn y dyhead pwysau negyddol dilynol a thorri meinwe craidd. Mewn arbrofion samplu dro ar ôl tro, mae angen i ymchwilwyr ddewis manylebau nodwyddau yn ôl pwysau corff anifeiliaid a maint esgyrn: nodwyddau biopsi byr a mân ar gyfer primatiaid bach (pwysau'r corff yn llai na 5kg), a nodwyddau Jamshidi hyd canolig 14G confensiynol ar gyfer unigolion canolig a mawr, gan sylweddoli cyfatebiaeth fanwl gywir rhwng offer a gwrthrychau arbrofol.

Rhagofalon Cyn Llawdriniaethol Allweddol ar gyfer Samplu Nodwyddau Biopsi

Er mwyn osgoi ceulo sbesimen, hemolysis a halogiad, a gwella'r gyfradd gymwys o samplau arbrofol, rhaid gweithredu rhag-driniaeth safonol a manylebau gweithredu ar gyfer nodwyddau biopsi cyn samplu. Yn gyntaf,rhag-drin nodwyddau a chwistrellau gwrthgeulo heparinyn orfodol. Cyn ei ddefnyddio, tynnwch ychydig bach o doddiant heparin i fflysio wal fewnol y nodwydd biopsi a'r chwistrell gyfatebol, a gollwng yr hylif gweddilliol yn llwyr, gan ffurfio cotio gwrthgeulydd heparin unffurf ar wal fewnol y ceudod nodwydd. Gall y llawdriniaeth hon atal hylif mêr esgyrn rhag ceulo'n gyflym ar ôl samplu, osgoi methiant paratoi ceg y groth a chanfod celloedd a achosir gan geulo sbesimen, a dyma'r cam cyn-driniaeth allweddol ar gyfer caffael hylif mêr esgyrn o ansawdd uchel.

Yn ail, ar gyfer -arbrofion samplu anifeiliaid hir dymor dro ar ôl tro,detholiad cylchdro o safleoedd twlldylid eu mabwysiadu er mwyn osgoi tyllu dro ar ôl tro ar un safle, a all arwain at hyperplasia esgyrn cortigol, adlyniad meinwe lleol a mwy o ymwrthedd i dyllu, gan arwain at fethiant samplu a mwy o drawma anifeiliaid. O ran cynllun analgesia, mae chwistrelliad analgesig lleol i groen a meinwe meddal dwfn y safle twll yn well nag anesthesia cyffredinol syml, a all leddfu dolur ac anghysur clwyfau ar ôl llawdriniaeth yn effeithiol, lleihau ymateb straen anifeiliaid, a hwyluso adferiad ar ôl llawdriniaeth ac arbrofion ailadroddus dilynol.

O ran rheoli cyfaint samplu, wedi'i gyfyngu gan gynhwysedd ceudod nodwydd y nodwydd biopsi a chyfaint gwaed ffisiolegol anifeiliaid arbrofol, ni fydd cyfaint samplu safle twll sengl yn fwy na 2mL. Bydd echdynnu gormodol yn arwain at wanhau gwaed ymylol difrifol, yn lleihau cyfran y celloedd cnewyllol a meinweoedd mêr esgyrn gweithredol yn y sbesimen, yn ymyrryd â chanlyniadau canfod arbrofol, ac yn effeithio ar gywirdeb dadansoddiad mynegai hematolegol ac arsylwi morffolegol meinwe.

Gweithdrefn Weithredu Safonol ar gyfer Tyllu Crib Iliag (Gweithrediad Nodwyddau Biopsi Craidd)

Arfbais Iliac yw'r safle samplu mwyaf confensiynol a dewisol ar gyfer biopsi mêr esgyrn primataidd nad yw'n ddynol, gydag asgwrn cortigol trwchus, meinwe hematopoietig ceudod medwlaidd cyfoethog ac ychydig o organau pwysig cyfagos, sy'n cynnwys diogelwch uchel a chyfradd llwyddiant samplu uchel. Ar ôl i'r anifail gael ei anestheteiddio'n llawn, rhowch ef mewn safle sy'n dueddol o fod, plygwch y ddwy fraich fraich o dan yr abdomen i godi asgwrn y glun a datguddio'r ardal samplu crib iliac yn llawn. Mae gan y rhan fwyaf o archesgobion nad ydynt yn ddynol wallt tenau yn ardal y crib iliac, sydd angen eillio syml a pharatoi croen yn unig. Mae'r croen yn cael ei ddiheintio bob yn ail ag ïodin povidone ac alcohol, a gosodir tywel twll di-haint i ynysu'r ardal lawfeddygol a sicrhau gweithrediad di-haint.

Ar ôl cadarnhau ffin y crib iliac trwy grychguriad, gwnewch doriad croen bach gyda llafn llawfeddygol di-haint ar ochr flaen y crib iliac i leihau ymwrthedd ffrithiant y nodwydd biopsi yn ystod treiddiad. Alinio'r nodwydd biopsi Jamshidi 14G â'r toriad, symud ymlaen yn araf i ymyl dorsal blaenorol y crib iliac, cadwch y corff nodwydd yn berpendicwlar i'r awyren crib iliac drwy'r amser, a rhowch bwysau parhaus a sefydlog ar i lawr wrth gylchdroi'r corff nodwydd yn glocwedd. Yr ystum gosod nodwydd fertigol yw'r allwedd i fiopsi llwyddiannus, a all sicrhau bod blaen y nodwydd yn mynd i mewn i'r ceudod medullary yn gywir, osgoi treiddiad lletraws gan arwain at hollti esgyrn cortigol a difrod meinwe cyfagos, a gwneud y mwyaf o berfformiad torri a samplu blaen nodwydd y biopsi.

Pan fydd y corff nodwydd yn treiddio i'r asgwrn cortigol, bydd y gweithredwr yn amlwg yn teimlo gostyngiad sydyn mewn ymwrthedd treiddiad, a gellir gosod y nodwydd biopsi yn sefydlog yn y meinwe esgyrn heb ysgwyd, gan nodi bod blaen y nodwydd wedi mynd i mewn i'r ceudod medullary yn llwyddiannus. Ar yr adeg hon, tynnwch y stylet canolog allan yn llwyr, cysylltwch chwistrell di-haint 10mL i gynffon y nodwydd biopsi, a rhowch bwysau negyddol sefydlog trwy dynnu'r piston. Mae mêr esgyrn primatiaid ffres yn goch tywyll ac yn ewynnog, gyda gludedd uwch na gwaed ymylol, ac mae'n cynnwys meinwe asgwrn trabeciwlar lliw golau bach, sy'n sbesimen mêr esgyrn cymwys.

Os na chaiff hylif mêr esgyrn ei dynnu, peidiwch â thynnu'r corff nodwydd allan yn ddall. Cylchdroi'r nodwydd biopsi 90 gradd -180 gradd i addasu ystod torri a samplu blaen y nodwydd; os yw'n dal yn annilys, ailgyflwyno'r stylet, addasu dyfnder y corff nodwydd ychydig ymlaen neu yn ôl, a rhoi pwysau negyddol eto. Ar gyfer sbesimenau arbrofol diagnostig, rheolir cyfaint samplu un safle o fewn 1mL i sicrhau purdeb sbesimen; os oes angen llawer iawn o samplau mêr esgyrn ar gyfer arbrofion, rhaid dewis safleoedd tyllu lluosog i'w samplu yn lle echdynnu gormodol ar un safle. Ar ôl samplu, tynnwch y nodwydd biopsi allan yn gyflym, cymhwyswch hemostasis cywasgu uniongyrchol ar y safle twll am amser hir, a phwythwch y croen gyda phwythau llinyn sengl os bydd gwaedu parhaus yn digwydd.

Tyllu a Biopsi Gweithredu Fossa Trochanterig Femoral a Diwedd Procsimol Humeral

Mae'r fossa trochanteric femoral yn safle samplu atodol delfrydol ar gyfer primatiaid bach nad ydynt yn ddynol (pwysau corff<5kg). The local bone structure is shallow, and the medullary cavity is concentrated, which is convenient for the positioning and penetration of fine-gauge biopsy needles. However, the proximal thigh muscle layer of large primates is thick, resulting in large puncture resistance and difficult operation. The core operation principle is consistent with iliac crest biopsy: place the animal in lateral position, hold the proximal thigh with the palm, locate the trochanteric fossa at the inner and distal side of the femoral greater trochanter by thumb palpation, insert the biopsy needle toward the femoral shaft to penetrate into the medullary cavity, and complete negative pressure aspiration and specimen collection according to the standard needle operation procedure.

Mae'r humerus procsimol yn safle samplu amgen effeithlon arall. Mae diamedr yr asgwrn hir humeral yn fwy, ac mae'r ceudod medullary yn ehangach ac yn fwy bas, gan wneud gosodiad y nodwydd biopsi yn fwy cywir a'r llawdriniaeth yn symlach. Rhowch yr anifail yn ei safle ochrol, daliwch y blaenelimb procsimol, palpate y sylcws rhyng-twbercwlaidd rhwng y cloronyn humeral mwy a lleiaf, rhowch y nodwydd biopsi tuag at y siafft humeral i fynd i mewn i'r ceudod medwlari. Mae gan y safle hwn ofynion isel ar gyfer cywirdeb corff nodwydd, cyfradd methiant tyllau isel, ac mae'n addas ar gyfer samplu cyflym ac arbrofion anifeiliaid swp.

Dull Darlifiad Esgyrn Hir a Nodwyddau Biopsi Craidd-Rhaglen Fanwl

Yn wahanol i dyllu nodwydd sengl confensiynol, mae'r dull darlifiad esgyrn hir (Kushida et al., 2000) yn dechnoleg samplu mêr esgyrn purdeb uchel sy'n addas ar gyfer arbrofion manwl uchel, sy'n gofyn am ddefnydd cydweithredol o ddwy nodwydd biopsi mêr esgyrn. Mae angen i'r llawdriniaeth fewnosod nodwyddau biopsi cyfatebol yn y ceudod medullary ar ddau ben y siafft asgwrn hir yn y drefn honno, chwistrellu halwynog normal di-haint yn araf trwy un nodwydd biopsi, a chasglu'r mêr esgyrn sy'n cynnwys perfusate i gynhwysydd caeedig di-haint trwy'r tiwb estyniad sydd wedi'i gysylltu â'r nodwydd arall. Mae'r modd samplu cydweithredol nodwydd deuol hwn i bob pwrpas yn osgoi halogiad gwaed ymylol mewn tyllau confensiynol, ac mae gan y sbesimenau mêr esgyrn a gafwyd purdeb uwch, sy'n addas ar gyfer gwahanu bôn-gelloedd, diwylliant in vitro ac arbrofion canfod omics manwl uchel.

Gweithrediad Gwahaniaethol o Ddyhead Mêr Esgyrn a Biopsi Craidd yn Seiliedig ar Nodwyddau Biopsi

Mae dyhead mêr esgyrn a biopsi craidd yn rhannu'r un safle samplu a chyfarpar nodwydd biopsi, ond mae'r rhesymeg gweithredu nodwydd ôl-lawdriniaethol yn hollol wahanol, sy'n pennu'r ddau fath o sbesimenau arbrofol: hylif mêr esgyrn hylif a meinwe craidd mêr esgyrn solet. Yndyhead mêr esgyrn, ar ôl i'r nodwydd biopsi gael ei osod yn y ceudod medullary, tynnwch y stylet allan a chysylltwch chwistrell i gymhwyso pwysau negyddol i echdynnu hylif mêr esgyrn hylif, a ddefnyddir ar gyfer cyfrif celloedd, morffoleg ceg y groth a chanfod cytometreg llif.

Ynbiopsi craidd mêr esgyrngan ganolbwyntio ar sbesimenau meinwe, ar ôl tynnu'r stylet allan, mae nodwydd biopsi Jamshidi yn cael ei ddatblygu ymhellach 1-2cm i mewn i'r ceudod medullary trwy bwysau sefydlog a chylchdroi araf. Gall ymyl torri troellog blaen y nodwydd lapio meinwe craidd y mêr esgyrn yn llwyr. Yna llacio'r corff nodwydd trwy gylchdroi a siglo, tynnu'n ôl ychydig ac ail-osod i wahanu gwaelod y meinwe graidd o'r trabeciwla asgwrn. Ar ôl cadarnhau bod y meinwe wedi'i wahanu'n llwyr, tynnwch y nodwydd biopsi allan yn gyfan gwbl trwy tyniant cylchdro. Yn olaf, gwthiwch y sbesimen craidd mêr esgyrn solet cyfan allan o'r ceudod nodwydd gyda gwthiwr llinellol, a'i drwsio â fformalin 10% ar gyfer toriad meinwe a dadansoddiad patholegol.

Casgliad

Cymhwyso nodwyddau biopsi mêr esgyrn wedi'u safoni yw'r allwedd graidd i lwyddiant arbrofion biopsi a thyllu mêr esgyrn primatiaid nad ydynt yn ddynol. Y nodwydd biopsi Jamshidi 14G, gyda'i ddyluniad strwythurol optimaidd a pherfformiad samplu sefydlog, yw'r offer a ffefrir ar gyfer biopsi craidd NHP. Mae angen i ymchwilwyr ddewis manylebau nodwyddau yn ôl math o gorff anifeiliaid a dibenion arbrofol, gweithredu'n llym rhag-drin heparin, gweithrediad di-haint a phrotocolau cylchdroi safle, a meistroli'r technegau gweithredu gwahaniaethol o ddyhead a biopsi craidd. Gall dewis a gweithredu nodwyddau safonedig wella purdeb a chywirdeb sbesimen yn effeithiol, lleihau trawma anifeiliaid a gwallau arbrofol, a darparu cymorth technegol cadarn ar gyfer ymchwil haematoleg rag-glinigol ac ymchwil meddygaeth drosiadol yn seiliedig ar fodelau primatiaid nad ydynt yn ddynol.