https://www.chamfondbiotech.com/4-mathau-o-asgwrn-mêr-biopsy-needles/

I. Sail Microanatomegol ac Egwyddorion Arholiad

1.1 Cyfansoddiad Histolegol Mêr Esgyrn

Mêr esgyrn yw'r organ hematopoietig fwyaf a mwyaf gweithgar yn y corff dynol, yn cyfrif am tua 4%-5% o gyfanswm pwysau'r corff, gyda chyfanswm cyfaint o tua 2.6-4.0 kg (mewn oedolyn 70-kg). O safbwynt histolegol, mae mêr esgyrn yn cynnwys dwy gydran graidd:

Celloedd parenchymal hematopoietig: Mae'r rhain yn cynnwys bôn-gelloedd hematopoietig (HSCs), celloedd epil o linachau amrywiol, a chelloedd gwaed aeddfed ar wahanol gamau o wahaniaethu. O dan amodau ffisiolegol, mae bôn-gelloedd hematopoietig yn cael eu rhannu'n anghymesur er mwyn cynnal hunanadnewyddiad tra'n gwahaniaethu ar hyd y llwybrau myeloid (erythroid, granulocytig{-monocytig, megacaryocytig) a lymffoid (T-cell, B-cell, cell NK),).

Micro-amgylchedd hematopoietig (HME): Yn cynnwys celloedd reticular, celloedd endothelaidd fasgwlaidd, ffibroblastau, adipocytes, matrics allgellog (ffibrau colagen, ffibronectin, laminin, ac ati), a therfynau nerfau. Mae'r micro-amgylchedd hwn yn cyfrinachu cytocinau (ee, SCF, TPO, G-CSF, IL-3) ac yn darparu sgaffaldiau ffisegol i reoleiddio cartrefu, amlhau a gwahaniaethu HSC yn fanwl.

Nodweddir y system fasgwlaidd o fewn y ceudod mêr esgyrn gansinwsoidau​ - rhwydwaith o gapilarïau â waliau tenau â bylchau endothelaidd wedi'u lledu. Mae celloedd gwaed aeddfed yn croesi'r endotheliwm sinwsoidal i fynd i mewn i'r cylchrediad ymylol. Mae cyfanrwydd strwythurol y sinwsoidau hyn yn effeithio'n uniongyrchol ar p'un a yw sbesimenau allsugn yn cael eu gwanhau yn ystod tyllu mêr esgyrn, ac mae hefyd yn ddangosydd morffolegol pwysig ar gyfer gwerthuso neofasgwlaidd a ymdreiddiad annormal mewn sbesimenau biopsi.

1.2 Trosi Deinamig Rhwng Mêr Coch a Mêr Melyn

Cydberthynas glinigol: Ar adrannau biopsi mêr esgyrn, mae staen AU yn caniatáu gwahaniaeth gweledol uniongyrchol rhwng ardaloedd mêr coch (cell-trwchus, wedi'i staenio'n dywyll) ac ardaloedd mêr melyn (gwactod braster, wedi'u staenio'n ysgafn). Mae newidiadau yn y gymhareb hon (ee, graddiad celledd mêr) yn ddangosyddion allweddol ar gyfer asesu cronfa hematopoietig. Ni all profion taeniad allsugno mêr esgyrn ddarparu'r wybodaeth ofodol hon.

1.3 Sail Resymegol Fiolegol Y Tu ôl i'r Ddau Ddull Arholi

Mae'r rheswm y mae dyhead mêr esgyrn a biopsi yn wahanol o ran gwerth diagnostig yn y bôn yn wahanoldimensiynau mêr maen nhw'n "gweld":

Dyhead mêr esgyrncnwd aataliad datgysylltiedig o gelloedd rhydd​ - y fantais yw arsylwi morffolegol cydraniad uchel a staenio sytocemegol celloedd unigol; yr anfantais yw colli'r berthynas ofodol wreiddiol o gelloedd o fewn y meinwe (y wybodaeth "pwy nesaf at bwy" yn cael ei golli).

Biopsi mêr esgyrncnwd aadran feinwe tri dimensiwn​ - mae'n cadw'r berthynas ofodol rhwng celloedd a'r micro-amgylchedd (yr "effaith gymdogaeth"), ond ar draul colli rhywfaint o fanylion cellog mân oherwydd gosod a thorri.

Mae'r berthynas rhwng y ddau yn cyfateb i"Edrych ar bentwr o frics LEGO rhydd"(dyhead) yn erbyn"Edrych ar fodel LEGO wedi'i gydosod yn llawn"​ (biopsi) - mae'r cyntaf yn caniatáu archwiliad clir o siâp a lliw pob bricsen; mae'r olaf yn datgelu'r strwythur cyffredinol a'r patrwm cydosod. Mewn diagnosis clinigol, nid yw'r naill na'r llall yn wariadwy.

II. Gwahaniaethau Strwythurol mewn Offerynnau Gweithredu

2.1 Egwyddorion Dylunio Nodwyddau Dyhead Mêr Esgyrn

Y nodwyddau dyhead a ddefnyddir amlaf mewn ymarfer clinigol yw'rJamshidi-wedi'i addasuneuTeip-Rochenodwyddau. Mae eu cydrannau craidd yn cynnwys:

Egwyddor gweithio: Ar ôl i'r nodwydd dreiddio i'r cortecs a mynd i mewn i'r ceudod medullary, caiff y stylet ei dynnu ac mae chwistrell sych wedi'i gysylltu i gynhyrchu pwysau negyddol, gan dynnu hylif mêr i'r chwistrell. Mae maint a hyd pwysau negyddol yn effeithio'n uniongyrchol ar ansawdd sbesimen - pwysedd negyddol gormodol neu ddyhead hir yn achosi mewnlifiad enfawr o waed sinwsoidaidd, gan greu "arteffact gwanhau."

2.2 Egwyddorion Dylunio Nodwyddau Biopsi Mêr Esgyrn

Rhennir nodwyddau biopsi mêr esgyrn yn ddau gategori mawr gydag athroniaethau dylunio tra gwahanol:

(1) Treffin / Nodwyddau Torri

Cynrychiolir gan yNodwydd biopsi Jamsidi(y safon ryngwladol ar hyn o bryd):

Egwyddor gweithio: Mae'r stylet mewnol a'r canwla allanol yn cael eu cylchdroi gyda'i gilydd i'r mêr i ddyfnder a bennwyd ymlaen llaw. Yna caiff y stylet ei dynnu'n ôl, ac mae'r canwla allanol yn cael ei gylchdroi ymhellach i dorri craidd silindrog byr o feinwe mêr esgyrn, sydd wedyn yn cael ei dynnu'n ôl ynghyd â'r canwla.

(2) Nodwyddau Llif Rotari (Pwnsh Biopsi)

Cynrychiolir gan ynodwydd biopsi Islam, sy'n defnyddio mecanwaith torri cylchdro cyflymder uchel. Mae'r nodwyddau hyn yn cael eu defnyddio'n llai cyffredin mewn ymarfer clinigol heddiw ac fe'u cyflogir yn achlysurol ar gyfer safleoedd penodol (ee, biopsi sternal).

2.3 Arwyddocâd Biolegol a Chlinigol Gwahaniaethau Diamedr Nodwyddau

Nodyn technegol: Nid yw dyluniad mwy trwchus y nodwydd biopsi yn ymwneud â "chymryd mwy o ddeunydd" - yn unig, ei bwrpas craidd yw sicrhau bod diamedr craidd y meinwe yn ddigon mawr i gadw niferoedd celloedd digonol a phensaernïaeth ofodol ar ôl torri'r toriad. Os yw'r craidd yn rhy denau (<1.5 mm diameter), it is highly prone to fragmentation or distortion during decalcification and sectioning, severely compromising diagnostic value.

III. Gwahaniaethau Sylfaenol mewn Caffael a Phrosesu Sbesimenau

3.1 Dyhead Mêr Esgyrn: Llif Gwaith Llawn Dadansoddiad Sytolegol Sbesimen Hylif

(1) Pwyntiau Dyhead Allweddol Technegol

Detholiad chwistrell: A chwistrell sych 10 mlyn cael ei argymell. Mae sychder yn hollbwysig - gall hyd yn oed olrhain symiau o leithder ysgogi'r rhaeadru ceulo, gan achosi i'r sampl mêr geulo cyn ceg y groth, gan arwain at sefyllfa drychinebus "dim celloedd i'w gweld".

Rheoli cyfaint dyhead: 0.2-0.5 ml yw'r gorau posibl. Rhy ychydig (<0.1 ml) may result in insufficient cell density on the smear; too much (>1.0 ml) yn achosi mewnlifiad gwaed sinwsoidal gormodol a gwanhau gwaed ymylol - bydd y ceg y groth yn dangos digonedd o lymffocytau aeddfed a neutrophils, tra bod y ganran chwyth yn cael ei "wanhau" i lawr, gan arwain yn hawdd atnegatifau ffug neu danamcangyfrif baich afiechyd.

Cyflymder dyhead: Dylai fodaraf a chysoner mwyn osgoi pwysau negyddol gormodol ar unwaith.

(2) Llif Gwaith Paratoi Ceg y groth Safonol

(3) Systemau Staenio

Staeniad arferol: Wright{0}}Mae staen cyfansawdd Giemsa yn dangos yn glir batrymau cromatin niwclear, niwcleoli, gronynnau cytoplasmig, a gwagolau.

Staenio sytocemegol: Yn cynnwys peroxidase (POX), Sudan du B (SBB), esteras nad yw'n -benodol (NSE), esteras penodol (CE), asid cyfnodol-Schiff (PAS), ac asid ffosffatase (ACP) - yn hanfodol ar gyfer dosbarthiad FAB o lewcemia acíwt.

Staenio haearn: staenio mêr glas Prwsia i asesu haearn mewngellol ac allgellog - y safon aur ar gyfer gwneud diagnosis o anemia diffyg haearn ac anemia clefyd cronig.

3.2 Biopsi Mêr Esgyrn: Llif Gwaith Llawn Dadansoddiad Histopatholegol Sbesimen Solet

(1) Pwyntiau Allweddol Technegol Caffael Meinwe

Safle a ffefrir: Asgwrn cefn iliac uwchraddol​ - cortecs tenau, digonedd o fêr, gweithrediad diogel, a hyd ac ansawdd craidd gorau posibl.

Ongl gosod: Perpendicwlar i wyneb yr asgwrn, uwch gyda mudiant cylchdro.

Dyfnder caffael: Fel arfer symud ymlaen i 1.5-2.0 cm; mae treiddiad dyfnach yn cynyddu poen heb gynyddu gwybodaeth ddiagnostig yn sylweddol.

Adalw craidd: Ar ôl torri cylchdro, tynnwch y canwla allanol gyda'r craidd yn araf. Bydd stribed bach o feinwe gwyn llwydaidd (tua sesame- i -grawn-maint) bach yn weladwy ar flaen y nodwydd.

(2) Camau Hanfodol mewn Gosod Sbesimen

(3) Dad-galcholi ac Ymgorffori

Y cam cyn-brosesu mwyaf unigryw a heriol ar gyfer biopsi mêr esgyrn ywdecalcification:

Egwyddor: Mae meinwe asgwrn yn cynnwys toreth o grisialau hydroxyapatit, y mae'n rhaid eu hydoddi gan gyfryngau dadgalchu asidig (ee, EDTA, cymysgeddau asid fformig-formaldehyde) i feddalu'r meinwe i gyflwr y gellir ei dorri.

Dewis dull:

decalcification EDTA​ (argymhellir): Mae gweithredu chelating yn ysgafn, yn cadw antigenau meinwe a DNA yn dda, sy'n addas ar gyfer IHC i lawr yr afon a phrofion moleciwlaidd; anfantais yn para hir (3-7 diwrnod).

Decalcification cyflym asid​ (ee, dull asid nitrig): Cyflym (sawl awr) ond yn achosi difrod sylweddol i antigenau ac asidau niwclëig, a allai effeithio ar brofion i lawr yr afon.

Mewnosod paraffin: Ar ôl dad-galcholi, mae'r meinwe'n mynd trwy ddadhydradu alcohol graddiant, clirio xylene, ymdreiddiad paraffin, a'i fewnosod i floc paraffin.

(4) Toriad a staenio

IV. - Cymhariaeth Fanwl o Fanteision Diagnostig

4.1 Manteision Unigryw Dyhead Mêr Esgyrn - Dadansoddi Dwfn

(1) Diagnosis Morffolegol Cydraniad Sengl-Cell

Cryfder mwyaf taeniadau mêr yw hynnypob cell yn "lledaenu ar wahân"​ - gyda thechneg taenu dda, mae celloedd yn cael eu trefnu mewn un haen mono heb orgyffwrdd. Mae hyn yn galluogi'r patholegydd i archwilio pob cell o dan drochi olew (1000 ×) ar gyfer:

Brasder cromatin niwclear a phatrymau dosbarthu

Nifer, maint, ac amlygrwydd niwcleoli

Lliw cytoplasmig, mathau o ronynnau (azurophilic, neutrophilic, eosinophilic, ac ati)

Maint celloedd a rheoleidd-dra morffolegol

hwncydraniad "cell-lefel".​ yn anghyraeddadwy gydag adrannau biopsi - mewn adrannau meinwe 3-5 μm o drwch, mae niwclysau yn aml yn gorgyffwrdd yn fertigol, mae manylion cytoplasmig yn cael eu cywasgu, ac mae'n anodd iawn dosbarthu celloedd unigol yn fanwl gywir.

(2) Asesiad Megakaryocyte Manwl

Megacaryocytes yw'r celloedd mwyaf yn y mêr (hyd at 50-100 μm mewn diamedr). Mae annormaleddau morffolegol yn hanfodol yn ddiagnostig ar gyfer sawl anhwylder:

Ar brawfiadau, mae'r annormaleddau hyn yn amlwg iawn; mewn adrannau biopsi, mae megakaryocytes yn aml yn cael eu cuddio gan gelloedd eraill ac mae'n anodd gwerthfawrogi eu morffoleg lawn oherwydd cyfyngiadau trwch adrannau.

(3) Gwerth Mesuradwy Staeniau Sytocemegol

Gall canlyniadau staenio sytocemegol ar brofion taeniad mêr fodwedi'i feintioli'n fanwl gywir​ - er enghraifft, mynegir cyfradd positifrwydd POX fel canran (ee, "positivity POX 85%"), sy'n faen prawf craidd ar gyfer gwahaniaethu AML oddi wrth BOB UN. Mewn adrannau biopsi, mae gweithgarwch ensymau a dyddodiad cromogen yn cael eu heffeithio gan sefydlogiad a dad-galcheiddio, gan roi canlyniadau lled-meintiol yn unig ("gwan-bositif" neu "ffocws positif"), heb werthoedd rhifiadol manwl gywir.

4.2 Manteision Unigryw Biopsi Mêr Esgyrn - Dadansoddiad dwfn

(1) Cyfran Gofodol o Hematopoietic vs. Meinwe Brasterog

Mewn adrannau biopsi, gall y gymhareb o fêr coch (ardal hematopoietig) i fêr melyn (ardal brasterog) fod yndelweddu a meintioli'n uniongyrchol. Mae mêr oedolyn arferol yn cynnwys tua 30%-50% meinwe hematopoietig a 50% -70% braster. Mae newidiadau yn y gymhareb hon â goblygiadau diagnostig sylweddol:

(2) Gwerthusiad Cywir o Ddwysedd Celloedd Niwclear

Mae adrannau biopsi yn caniatáu cyfrifocyfrif celloedd cnewyllol fesul milimetr sgwârneu ddefnyddio asystem raddio celledd lled-meintiol(5 haen):

Mae'r asesiad celledd hwn sy'n seiliedig ar fiopsi yn fwy gwrthrychol na gwerthusiad ceg y groth - mae ceg y groth yn adlewyrchu dwysedd celloedd yn unig yn "y ffracsiwn bach a ddyheadwyd," tra bod biopsi yn datgelu "panorama llawn" y ceudod mêr cyfan.

(3) Osgoi Gwanediad Sinwsoidaidd - Yn Adlewyrchu Statws Hematopoietig yn Wirioneddol

Yn ystod dyhead, mae pwysau negyddol yn anochel yn tynnu gwaed sinwsoidaidd ynghyd â hylif mêr, gan achosi rhywfaint o wanhau. Er y gall gweithredwyr profiadol leihau hyn trwy reoli cyfaint dyhead, mae'nni ellir ei ddileu yn llwyr. Mewn cyferbyniad, nid yw creiddiau meinwe biopsi yn destun gwanhad sinwsoidaidd - mae gwaed sinwsoidaidd yn cael ei olchi i ffwrdd yn ystod sefydlogiad, ac mae'r celloedd a welir ar yr adran yn gelloedd mêr parenchymal yn unig. Mae hyn yn arbennig o bwysig wrth werthusoISD hypogellogneumyelofibrosis cynnar.

(4) Gwerth Diagnostig ar gyfer Clefydau Penodol

(5) Diagnosis Gwahaniaethol o "Tap Sych" - Rôl Anadferadwy Biopsi

Diffinnir "tap sych" fel: mae'r nodwydd dyhead yn amlwg wedi mynd i mewn i'r ceudod mêr, ond nid yw ymdrechion dro ar ôl tro yn cynhyrchu unrhyw hylif. Achosion cyffredin a gwerth diagnostig biopsi:

V. Cyfyngiadau a Gymharir - Dadansoddiad Dyfnion

5.1 Cyfyngiadau Dyhead Mêr Esgyrn

(1) Dinistrio Pensaernïaeth Naturiol - Colli'r "Rhwydwaith Cymdeithasol Cellog"

Mae aspiration yn gwasgaru meinwe mêr esgyrn i mewn i un daliant cell. Er bod hyn yn hwyluso archwiliad celloedd unigol, mae'n golygucolli gwybodaeth am y berthynas ofodol rhwng celloedd yn llwyr, gan gynnwys:

Anallu i benderfynu a yw ffrwydradau wedi'u clystyru (ffenomen ALIP)

Anallu i asesu amlder ffibr reticwlin

Anallu i wahaniaethu rhwng ffiniau parthau hematopoietig a brasterog

Y wybodaeth hon yw'r union beth sydd fwyaf hanfodol wrth wneud diagnosis o MDS a myelofibrosis.

(2) Gwanediad Sinwsoidal - Y Risg o "Watering Down"

Hyd yn oed yn y dwylo mwyaf profiadol, mae sbesimenau allsugno yn anochel yn cynnwys rhywfaint o waed sinwsoidal. Mae astudiaethau'n dangos bod tuaMae 10%–30% o gelloedd mewn profion taeniad allanadlu mêr arferol yn tarddu o wanhau sinwsoidaidd. Mae'r effaith wanhau hon yn arbennig o amlwg yn:

Over-aspiration (>1 ml)

Dyhead rhy gyflym

Cleifion â gorsplesedd sylweddol (llif sinwsoidal cyflymach)

Mêr hypogellog yn ei hanfod (llai o gelloedd normal, cymhareb gwanhau uwch)

Y canlyniad: mae canrannau chwyth yn cael eu tanamcangyfrif, gan gamddosbarthu MDS risg uchel yn-risg isel o bosibl, neu fethu diagnosis AML yn gyfan gwbl.

(3) Tap Sych - "Diwedd Marw" Methiant Arholiad

Fel y disgrifiwyd uchod, pan fydd tap sych yn digwydd, nid yw dyhead yn rhoi unrhyw sbesimen dilys. Heb fiopsi dilynol, mae'r claf yn wynebu bwlch diagnostig hirfaith ac o bosibl y boen ychwanegol o ailadrodd triniaethau.

5.2 Cyfyngiadau Biopsi Mêr Esgyrn

(1) Anhawster wrth Adnabod Math o Gell - "Dallineb Wyneb mewn Torf"

Mewn adrannau meinwe 3–5 μm o drwch, mae niwclysau yn gorgyffwrdd yn fertigol ac mae cytoplasm yn cael ei gywasgu, gan arwain at:

Anhawster gwahaniaethu rhwng myeloblastau a monoblastau (mae staenio POX ar brawf taeniad yn datrys hyn)

Anallu achlysurol i wahaniaethu rhagflaenwyr erythroid o lymffocytau

Anhawster eithafol wrth adnabod micromegakaryocytes

Felly, er y gall biopsi ddweud wrthych "mae yna lawer o gelloedd dwys yma," mae'nNi all ddweud wrthych yn union beth yw'r celloedd hynny mewn gwirionedd.

(2) Delweddu Cyfyngedig o Adeileddau Mewngellol Cain - "Datrysiad Picsel Annigonol"

Mae camau prosesu - gosodiad (formalin), dad-galcheiddio (amgylchedd asidig), ac ymgorffori (paraffin wedi'i gynhesu) - yn achosi rhywfaint o grebachu ac afluniad celloedd:

Gall niwcleolio fynd yn aneglur neu ddiflannu

Gall gronynnau sytoplasmig hydoddi neu symud safle

Mae gwiail Auer (nodwedd o AML) yn hynod o anodd i'w hadnabod mewn adrannau

Ar brofion taeniad, mae'r adeileddau mân hyn i'w gweld yn glir mewn celloedd byw sydd newydd eu gosod neu'n agos at-.

(3) Anhawster Meintioli Staeniau Sytocemegol - "Ansoddol ond Ddim yn Feintiol"

Fel y nodwyd, mae prosesu yn effeithio ar weithgaredd ensymau a chadwraeth antigen mewn adrannau biopsi. Mae canlyniadau staenio sytocemegol gan fwyaf yn lled-meintiol (ee, "cadarnhaol" neu "wan-gadarnhaol"), heb yr union werthoedd canrannol y gellir eu cyflawni ar brofion taeniad. Mae hwn yn ddiffyg amlwg yn union isdeipio lewcemia acíwt.

VI. Perthynas Gyflenwol mewn Penderfyniad Clinigol-Gwneud - O Ganllawiau i Ymarfer

6.1 Argymhellion o Ganllawiau Mawr

6.2 Strategaeth safonedig "Un Tynnu, Un Biopsi".

Mae canolfannau haematoleg rhyngwladol mawr yn mabwysiadu'r strategaeth yn eanganesthesia sengl, safle twll sengl (asgwrn cefn iliac uwchraddol), dyhead dilyniannol ac yna biopsi:

6.3 Strategaeth Dethol Clefydau-Penodol

6.4 Cipolwg o Achos Nodweddiadol

Achos: Gwryw, 68 oed, blinder cynyddol a splenomegaly. CBS: Hb 82 g/L, WBC 4.2×10⁹/L, PLT 58×10⁹/L. Mae ceg y groth ymylol yn dangos celloedd teardrop achlysurol.

Dyhead yn unig: A allai gynhyrchu sbesimen wedi'i wanhau ychydig yn dangos "hypocellularity with few annormal cells" - annigonol ar gyfer diagnosis diffiniol; gellid ei gamddiagnosio fel "MDS hypocellular."

Biopsi yn unig: Byddai'n dangos ffibrosis wedi'i farcio a chwythiadau clystyrog, gan awgrymu PMF, ond byddai dosbarthiad chwyth manwl gywir yn amhosibl.

Cyfunol: Mae ceg y groth yn dangos-granulopoiesis wedi'i symud gyda chelloedd myeloid anaeddfed; biopsi yn dangos MF-2 ffibrosis, ALIP positif, a morffoleg megakaryocyte annormal - diagnosis cynhwysfawr:myelofibrosis cynradd (cynffibrotig/cam cynnar) gyda nodweddion ISD, gan ddarparu sylfaen fanwl gywir ar gyfer triniaeth ddilynol.